7  生物室主要仪器

仪器设备的正确使用是确保实验室安全和实验顺利进行的关键。以下是一些重要的注意事项和操作方法，涵盖了生物室的设备使用方面的内容：

• 设备清洁与维护： 在使用设备之前和之后，请确保进行适当的清洁和消毒，以防止交叉污染和实验结果的误差。定期进行设备维护和保养，确保设备处于良好的工作状态。

• 设备操作规范： 在使用任何设备之前，请仔细阅读并遵守相关的操作手册或指导。确保操作过程中按照正确的程序进行，并且在操作过程中保持警觉，随时准备应对可能出现的意外情况。

• 设备安全操作： 遵守设备的安全操作规程，包括正确使用个人防护装备、避免超出设备的额定容量和功率、以及正确处理可能存在的化学品和生物样本。

• 设备共享与预约制度： 如果实验室中的设备需要共享使用或者需要提前预约，请确保遵守实验室内部的相关规定和程序，以避免冲突和延误实验进度。

这些注意事项和操作方法将有助于保障实验室设备的安全运行和实验的顺利进行。接下来，我们将详细介绍一些常见设备的使用方法和操作注意事项，以便实验室成员能够更好地掌握设备的使用技巧，并在实验中取得更好的结果。

▲CRITICAL后续参考文献部分均经过挑选，以确保内容的准确性和可靠性。并尽可能减少视频长度，方便观看。

7.1 洁净仪器

7.1.1 离心机

用前准备

1. 打开电源开关，确定显示编号与转头相符。
2. 检查离心机内部是否有异物，如有异物应及时清理。
3. 检查离心机转头盖是否拧紧无缝隙，确认无误后方可启动离心机。
4. 检查转头无异常碰擦声响，过大振动和噪音；若存在异常立即停止使用，排除故障后继续使用。

操作步骤

1. 设定所需转速和离心时间。

▲CRITICAL再次检查转头编号和显示数字是否一致。

2. 将离心管管壁擦拭干净中心对称或轴对称放入离心机内，如样品数量不够需要配平。

! CAUTION务必按照 图 7.1 放置离心管，并在下一步前再次检查离心管是否放置正确，高速离心如未配平会引起严重后果。

3. 旋盖离心管需要检查管盖是否拧紧，高速离心管需要盖紧后加盖转头盖。
4. 开始离心，离心过程中不得随意离开，应随时观察离心机上的仪表是否正常工作，如有异常的声音应立即停机检查，及时排除故障。
5. 在离心机完全停止后方可开盖拿取离心样品。
6. 检查离心机转头，及时清洗、擦干，关闭电源。

注意事项

1. 转头是离心机中须重点保护的部件，轻拿轻放，保持洁净干燥。
2. 低温离心时，转头在使用前应放置于冰箱中进行预冷，离心结束后倒置转头并擦干腔内余水。
3. 开机前必须检查转头和转头盖是否拧紧无缝隙，确认无误后方可启动离心机。

参考资料

根据实验室已有型号转子，离心时请参考如下图片进行配平，如遇到无法配平情况，请自行增加配平离心管或增加离心批次。

图 7.1: 6孔离心机（8000 rpm离心机及污泥脱水离心机）

图 7.2: 24孔离心机（Eppendorf离心机）

• 转子配平策略图
• 24孔转子配平策略

7.1.2 超净工作台

用前准备

1. 穿戴好实验服，佩戴好手套。

! CAUTION实验服和手套能有效防止微生物进入人体和向周围环境传播。

2. 检查超净工作台设备情况，在设备良好的情况下继续使用。
3. 在飞书上进行预约登记。

▲CRITICAL预约登记可以更高效的安排多人实验进程，同时记录操作内容方便回溯污染来源。

! CAUTION多次使用且未登记者被查明后，会安排其进行生物室的整体污染去除清洁。

操作步骤

1. 使用前30分钟放入实验所需用品，打开紫外灯，照射20分钟后打开风扇，对操作区域进行灭菌。

▲CRITICAL务必在紫外灯开启20分钟后再开启风扇（否则臭氧浓度不够达不到杀菌效果），紫外灯照射时间不得超过30分钟，以免过快减少紫外灯管寿命。

2. 打开日光灯和风扇进行实验操作。

! CAUTION务必检查紫外灯已经关闭，避免皮肤和眼睛灼伤。

3. 操作过程中拿取物品，需要将物品和双手喷涂酒精后再重新进入超净工作台。
4. 操作结束后整理工作台面，喷洒75%乙醇溶液，并用内置酒精棉球由内向外擦拭干净，打开紫外灯照射20分钟，结束使用。

! CAUTION实验结束后，未清理台面，残留多余培养皿、细菌等污染性质物品，将会被安排清洁，多次未清理者会安排其进行生物室的整体污染去除清洁。

注意事项

1. 实验操作过程中禁止打开紫外灯。
2. 操作过程遇到飞虫进入，立即停止操作，在没有实验用菌的情况下进行紫外消杀。
3. 紫外灯不可长时间（< 45min）开启。
4. 接触电器开关需保持手部干燥。
5. 保持工作台内干燥和清洁。
6. 他人使用超净台时，尽可能减少超净台附近的走动。
7. 尽可能减少手部饰品、手表的佩戴。

操作技巧

1. 实验操作复杂可提前将打印好的操作步骤黏贴于超净台上方。
2. 操作过程中人为将台面分为污染高、低风险区（按照个人操作习惯）。
   • 高风险区：放置废液缸、取样菌种、含有样品的培养皿等。
   • 低风险区：移液枪、涂布棒、平板、未加菌的培养体系、枪头等。
3. 所有离心管和玻璃瓶在使用完成后对敞口进行密封。
4. 为避免污染，可用无菌墙头作为离心管开盖器。

仪器维护

1. 定期检查紫外灯管发光处氧化情况。
2. 定期擦拭超净台隔断玻璃内外面。
3. 定期检查超净台隔断玻璃密封条状态。
4. 定期检查超净台滤网洁净程度。

参考资料

1. 超净工作台内部操作
2. 超净工作台使用说明

7.1.3 qPCR仪

用前准备

1. 穿戴好实验服，佩戴好手套。
2. 检查金属孔板内无异物。

操作步骤

1. 打开仪器开关。
2. 新建实验文件，并对照实验设计方案填写对应孔板内容。
3. 开始扩增后，等待仪器进入循环阶段，直至实验结束。
4. 清理孔板内扩增产物及桌面，并关闭仪器电源。

注意事项

1. 实验开始前需要仔细检查8联管盖与管子本身的契合状态，并检查对应联管内有无气泡。

▲CRITICAL盖子未盖紧会导致样品逸散，直接导致仪器污染。

2. 实验结束后如需进行后续跑胶、测序等实验，应将扩增产物黏上封口膜后于-20/-80 ℃冷冻长期保存或4 ℃短期保存。

▲CRITICAL禁止在生物室打开扩增产物管盖，此举会造成污染（16S rRNA质控 \(C_T < 20-24\) ）并导致qPCR检测长时间暂停（至少2个月）。

3. 使用电脑登记过程中，禁止佩戴手套，以免污染鼠标和键盘。

操作技巧

1. qPCR相对丰度配套\(\Delta \Delta C_T\)法脚本较为完善，为使用该脚本请将实验文件名称规范命名为“姓名英文首字母和日期形式”。

! CAUTION首字母和日期之间不得有空格，日期格式为“YYYYMMDD”或近似格式用于脚本识别及污染发生后的溯源，命名例：XXX20240101。

▲CRITICAL名称不规范造成的溯源困难，将会被视为污染源头，后果参见上述注意事项。

仪器维护

1. 定期用棉签沾拭仪器孔板内部。
2. 注意保持仪器干燥。

7.1.4 倒置荧光显微镜

用前准备

• 穿戴实验服、手套，避免裸眼长时间直视光源。
• 检查显微镜机身及物镜是否干净，镜头处无灰尘或污渍。
• 确认电源线与电脑连接良好，光源处于关闭状态。

操作步骤

1. 开机顺序：电源总开关 → 电脑 → 光源（明场，荧光）→ 照相机。

2. 明场观察：

   • 打开显微镜左侧二级开关。
   • 旋钮调节入射光强度。
   • 物镜转盘：A，找到观察对象，进行粗调。

3. 相差观察：

   • 物镜转盘：PhL 对应 4×，Ph1 对应 10×/20×，Ph2 对应 40×。
   • 切换物镜时使用物镜下方黑色环，不可直接触碰镜身。
   • 拍摄明场需将物镜下方转盘调至空白位置。

4. 荧光观察：

   • 将亮度旋钮调至最低，关闭明场二级开关。
   • 打开物镜下方荧光光闸（远离身体一侧为打开）。
   • 转盘选择滤光片组：
   • UV：蓝色（激发 340–380 nm，发射 435–485 nm）
   • B：绿色（激发 460–500 nm，发射 510–560 nm）
   • G：红色（激发 540±12.5 nm，发射 605±22.5 nm）

5. 图像采集：

   • 打开软件，确认 PORT 旋钮在 “L” 位置。
   • 选择实时拍摄，调整自动曝光和自动白平衡（明场），或选择手动曝光（荧光）。
   • 选择合适的物镜倍数，曝光时间根据需要调整。
   • 点击拍照按钮保存图像，可插入刻度尺。

6. 保存文件：

   • 推荐格式：.tif或者.png，文件名规范为“姓名缩写+日期”。

7. 关机顺序：

   • 关闭光闸（明场：二级开关；荧光：物镜下方黑色拨片）。
   • 关闭光源 → 相机 → 软件与电脑 → 总电源。

注意事项

▲CRITICAL 荧光光源开启后至少运行 30 min 才能关闭；关闭后需等待 ≥30 min 才能再次开启。 ▲CRITICAL 相差调整旋钮禁止触碰。

操作技巧

• 调整亮度时应逐渐增加，避免光强过大造成样品漂白或损伤。
• 长时间观察荧光样品时，应尽量缩短曝光时间并使用快门遮挡，延长样品寿命。
• 拍摄图像时，文件名应遵循统一规范，避免后续数据管理与溯源困难。

仪器维护

• 每次使用后用镜头纸擦拭物镜，禁止使用粗糙纸巾。
• 定期检查光源使用时长，及时更换氙灯或汞灯。
• 保持显微镜防尘罩覆盖，避免环境灰尘污染。
• 定期由管理员进行光路校准与滤光片检查。

7.2 热源仪器

7.2.1 数显恒温水浴锅

用前准备

1. 本仪器使用电源为220V交流电，使用前请确定电源插座额定电流不小于10A，并具有安全接地装置，否则请更换插座
2. 在使用该仪器之前，如有实验液体撒入箱体内，应及时擦洗干净以免腐蚀仪器
3. 检查振荡器内用水状况

操作步骤

1. 设定摇晃速度，培养温度，确保振荡器内水位高度（一般高于震荡台）
2. 将所需震荡物品密封后平稳放置在暂停摇晃的震荡台上（倾斜可能导致甩出）
3. 打开开关，开始摇晃培养

注意事项

1. 当仪器托盘做振荡时，请勿将手伸入工作室内接触正在振荡的托盘或烧瓶
2. 在使用振荡功能时，以防烧瓶甩出，应在振荡器停止的状态下，才能打开仪器门。在放好烧瓶后，关闭好振荡培养箱门后，方可启动振荡功能
3. 仪器应做好经常性清洁工作（震荡期内水应干净无异味、异物），保持工作台面和操作面板的整洁
4. 仪器应旋转平稳，不能侧倾使用
5. 设备在搬运时，倾角不得大于45度
6. 摇晃溶液不得大于瓶身\(\frac{2}{3}\)

仪器维护

1. 仪器内水产生异味，伴有异物需取出培养样品，全面清洁摇床内部
   • 倒净摇床内部用水，拆下摇床
   • 用刷子彻底清洁摇床和基座内部
   • 用配置好的84溶液浸泡洗净的摇床和基座内部30分钟，冲洗干净
   • 组装并重新添加水浴用水

7.2.2 高温烘箱

用前准备

1. 观察烘箱内有无易燃物、可燃物、异物等危险物质，在使用前及时清理。
2. 观察烘箱周围有无易燃物、可燃物、异物等危险物质，在使用前及时清理。

操作步骤

1. 打开电源，设定目标温度，等待升温。
2. 放置物品时，上下四周应留存一定空间，保持箱内气流畅通。
3. 取物时佩戴隔热手套，缓慢打开箱门，切勿在高温状态下快速或急速开启箱门。
4. 通用电热恒温鼓风干燥箱可放置污染样品（污泥烘干），分子生物专用电热鼓风干燥箱（仅可放置无菌无酶离心枪头、离心管、试管架等）。
5. 将箱门轻轻关闭，检查箱门与硅胶密封条结合情况。

注意事项

1. 含易燃易爆等有机挥发性溶剂或助剂禁止放入箱内。
2. 关闭时不可太用力，避免造成箱体大幅振动。
3. 戴隔热手套取样，避免烫伤。
4. 拿取物品时避免头部直接正对箱门开口，需待箱内热量散失5-10秒。
5. 废弃物品不可随手弃置于烘箱周围。
6. 在断电室温情况下用酒精擦拭烘箱内部和样品架表面，清理掉落标签，等待酒精充分挥发后关闭箱门通电。
7. 禁止过夜使用烘箱，避免发生火灾。

7.2.3 高压灭菌锅

用前准备

1. 穿戴好实验服，戴好隔热手套。
2. 检查底部放气阀是否处于开放状态。

! CAUTION 放气阀开放可确保锅内压力维持在安全状态。

2. 检查灭菌锅水位，高水位指示灯。
3. ! CAUTION 检查锅盖排气阀、安全阀状态。
4. ! CAUTION 检查灭菌压力设置。
5. 观察高压灭菌锅周围有无易燃物、可燃物、异物等危险物质，在使用前及时清理。
6. 观察高压灭菌锅内有无易燃物、可燃物、异物等危险物质，在使用前及时清理。
7. 进行灭菌日期、操作人员和灭菌物品登记。

操作步骤

1. 将需灭菌的物品放入灭菌锅内，不可过多、堆叠放置。
   • 玻璃瓶类：培养液、培养基、缓冲液、无菌水等需要摇匀后略松瓶盖。
   • 离心管类：5 mL及以下离心管装入烧杯后用锡箔纸封闭杯口后放入，5 mL及以上离心管需要管盖分离灭菌（防止内外压力过大使离心管变形）。
   • 枪头类：装填完成后密封放入。
   • 配水桶需要检查桶内是否有残存液体，及液体性质不得为易挥发、易燃、易爆、有毒物质。
2. 打开电源，观察高水位指示灯是否常亮。

! CAUTION高水位指示灯常亮表示水位正常，否则需接适量纯水进行补充。禁止使用自来水添加，该行为会增加桶内结垢腐蚀，形成安全隐患。

3. 设置时间和温度后（一般不需操作，但需检查），旋至锅盖指示灯亮起，开始升温，并观察安全联锁灯是否亮起。
4. 灭菌锅开始工作（待温度升至98-100 °C，关闭下方排气阀），同时检查后方集水桶是否摆正。

! CAUTION不得触碰上方排气阀。

5. 等待灭菌锅继续升温至121 °C，若安全阀无异响，锅盖无漏气，方可继续灭菌。
6. 灭菌结束后，自然冷却（80 °C以下），确认压力表示数归零，缓慢打开底部排气阀，排尽剩余气体后，佩戴隔热手套，拿取灭菌物品。
7. 将锅内物品取出放入烘箱或室温冷却（装有试剂的玻璃瓶盖需要拧紧，未装有试剂的玻璃瓶需要取下瓶盖）。
8. 切断电源。

注意事项

1. 前三次使用必须有人在旁指导
2. 气未放尽前，不得开启高压锅
3. 灭菌物品应符合高压灭菌要求
4. 放进去的瓶子表面都不要有污垢，长期会腐蚀灭菌锅
5. 操作过程中小心烫伤
6. 灭菌液体不得超过所装容器2/3
7. 不得图省事过夜灭菌，避免发生安全事故
8. 锅内物品需要保持一定空隙，严禁挤压内筒

▲CRITICAL灭菌锅属于特种安全设备，如多次违规操作并引发安全事故，会背负法律责任。

仪器维护

1. 定期清理内筒。
2. 定期检查压力设置。
3. 定期检查安全阀和排气阀情况。

应急预案

1. 运行过程中遇到停电时：关闭电源，打开排气阀。
2. 运行中低水位报警时：关闭电源，打开排气阀，待蒸汽排空后，添加纯水至高液位指示灯亮起。
3. 运行中压力表显示正常，安全阀出现排气或压力表失灵时：立即关闭电源，打开排气阀直至压力表归零，通知检修人员维修，记录异常内容。
4. 运行中安全阀工作异常，压力超高无法泄压时：立即关闭电源，打开排气阀直至压力表归零，通知检修人员维修，记录异常内容。
5. 温度达不到设定温度时：立即关闭电源，打开排气阀直至压力表归零，通知检修人员维修，记录异常内容。
6. 不明原因报警时：立即关闭电源，打开排气阀直至压力表归零，通知检修人员维修，记录异常内容。
7. 筒体出现形变，泄露等异常情况时：立即关闭电源，打开排气阀直至压力表归零，通知安全负责人员，停止使用。

7.2.4 管式炉

用前准备

1. 使用者需提前登记使用人、使用时间、煅烧最高温度、保护气种类并备注是否有气体副产物产生（尤其是有毒气体）。使用前必须清楚炉管和法兰安装、设备运行、设备关闭的步骤。

2. 使用人需提前调研煅烧材料是否会在烧结过程中产生气体(尤其是有毒 气体），如果有有毒气体产生，需要配置足够的尾气吸收溶液进行尾气处理，并留下醒目告示。

3. 无论有无气体产生，煅烧过程中应保证通风橱闭合并全程开启风机。

4. 使用结束后，使用者要负责检查排气管及阀门有无堵塞，如有应负责清理，还要检查炉膛、法兰是否干净。炉管及时清理。

5. 煅烧材料不宜过多，易产生过多副产物或造成堵塞。单次最多2个煅烧舟。

6. 保持清洁，用前检查电炉接线是否接触良好。

7. 确保炉边没有导电尘埃、爆炸性气体及能严重破坏金属和绝缘的腐蚀性气体。

8. 禁止向炉内灌注液体、熔解的金属及易燃易爆有毒有害气体。

9. 升温速率和降温速率都不宜过快，一般保持在5 °C/min。

10. 使用石英管在真空下烧结，炉温不可超过1000 °C，否则石英管会炸裂。

11. 若在保护气氛下烧结，炉管内压力不可超过0.02 MPa。

12. 高温工作中不可以突然通入大量气体，无论是工作气体还是空气。

13. 随时检查出气口排气情况，若发现排气不畅，应该立即关闭进气阀，减压阀，关闭气瓶，停止煅烧，等冷却后疏通排气系统。

14. 控温程序结束语一定要设置“-121”！

15. 充气时石英管的两边管口不要站人。

设备启动步骤

1. 先放入一端炉堵，再把物料放入炉管内，用炉钩把物料推到正中间的位置，再放入另一端炉堵，然后安装上法兰密封。

2. 调节法兰支架上的支撑柱，用法兰支架托住法兰,以免法兰对炉管施加应力。

3. 旋转控制面板上的Switch旋钮，仪表灯亮。

4. 设置参数（参数设置程序不清楚不允许使用！），设置后按Turn on键，交流接触器吸合，听见“嘭”一声，否则请检查电路或与厂家联系。

5. 检测炉管的气密性，紧闭进气口和出气口阀门，出气口连接真空泵，打开出气口阀门，开启真空泵抽真空，抽到真空度达到要求后，关闭出气口阀门，拔出气管，关闭真空泵。等待一段时间看气压表的指针是否偏转，确认炉管气密性。如果有泄露，需要重新安装法兰密封，确保气密性后才能进入下一步操作。

6. 必须先通气再加热！停止通气也必须等炉子冷却后才能停止！通气时需要保持微微的正压，以免外面空气进入管内，任何时候，管内正压不得超过0.02 MPa。

7. 通气的操作流程是先将出气口气管置入尾气瓶内。确认减压阀阀门关闭后打开气瓶主阀门，打开减压阀（不要开太大！），打开进气阀，当压力表指针到0后，立即打开出气口阀门并开到最大。调节减压阀、进气阀，使得管内气压保持在0。炉管内压力不要超过0.02 MPa，若管内压力过大，立即关闭进气阀，关闭减压阀和气瓶，给管内泄压。

8. 长按Run键3秒，运行炉子。

关机步骤

1. 程序运行结束后，仪表处于“ Stop ”的基本状态。若中途需停止运行控温程序，按仪表的停止键使仪表处于“ Stop ”的基本状态。

2. 设备冷却到自然温度后，此时可关闭气瓶阀门，停止通气。

3. 按下 Turn-off 按键使主继电器断开。

4. 切换 Switch 开关切断控制电源。

5. 关闭总电源，工作结束。

6. 煅烧结束后，使用者要负责检查排气管及阀门有无堵塞，如有应负责清理，还要检查炉膛、法兰是否干净。炉管也要及时清理。

炉管和法兰安装

1. 把炉管从一端非常平行地插入，以免碰坏炉膛内的加热元件；不要把耐火材料碰坏，务必使炉管的两端出来的距离相等；

2. 安装法兰时，首先把炉管往外拉一点，再把法兰底座套入炉管上，并把O型圈套入炉管上，随后安装不锈钢卡环，再安装另一个O型圈。安装时注意使两个O型圈与卡环靠紧，最外面的O型圈离管口5 mm左右，使法兰盖套上并上螺丝时，炉管不抵住法兰盖。

3. 套上卡套法兰并用内六角扳上紧螺丝。为把法兰与炉管平行，在紧法兰螺丝时，每个螺丝紧一点后，再紧另一个螺丝一点，如此轮回几次，依次慢慢上紧，也不需要上得太紧，以达到密封效果为宜。

4. 盖上法兰盖，用卡箍固定好法兰盖。另一端也是同样顺序。

5. 上好法兰支撑架，注意左右法兰的同心度以及固定支架要协调好，不得有比较大的不规范的作用力。

设备常见开机电路故障及排除

1. 打开电源Switch锁后，Turnoff指示灯没有亮。
   • FU1保险丝断，关闭电源，联系厂家。
2. Circuit Open指示灯亮。
   • FU2保险丝断，关闭电源，联系厂家。
3. 电流表没有电流但是电压表有电压。
   • 加热元件损坏，关闭电源，联系厂家。
4. 电源一切正常但是炉子不工作，或仪表和电源都正常但是不能升温。
   • 仪表参数设置有误；线路故障。关闭电源，联系厂家。

煅烧程序设置

危险情况&应急预案

当高温管式炉出现意外情况时，首先需要进行情况评估及报告。操作人员应立即停止炉体加热并关闭气瓶阀门，疏散周边人员，确保自身安全，上报设备负责人及实验室负责人情况。核心原则：安全第一，人 > 物 > 环境。

1. 石英管突然炸裂。

   • 立即停止设备运行，按下停止键（Stop），关闭进气阀，关闭减压阀，关闭气瓶。关闭电源。

   • 向区域内所有人员发出清晰警报，操作人员及附近人员立即后撤到安全距离（至少数米外）。避免触碰飞溅的高温样品或碎片，立即上报设备负责人和实验室负责人。

   • 让炉体和内部碎屑自然冷却后，戴上耐高温手套和保护眼镜/面罩，使用硬质毛刷、坩埚钳等工具，将石英碎片小心扫入带盖的、坚硬厚实的专用容器​（如塑料桶、金属罐，标记为“锐器/石英废料”）中。​切勿直接用手捡拾。清理飞溅出的样品（若已知有害，按化学废弃物处理）。仔细检查炉腔内及排风管是否残留碎片。

   • 事后清查彻底检查炉体结构、加热元件、隔热层是否受损，清扫内部可能存在的微小石英粉尘。更换新的合格石英管前，​必须查明炸裂原因，避免再次发生。

2. 有毒气体泄漏。

   • 立即停止设备运行，按下停止键（Stop），关闭进气阀，关闭减压阀，关闭气瓶。关闭电源。最好能同时判别泄露点。（此步骤最好先配套有效且匹配的呼吸防护器，​禁止在未佩戴有效、匹配的呼吸防护器的情况下试图去关闭远处或难以接触的阀门）

   • 大声警告所有人，所有人立即、迅速、有序地沿着预定逃生路线撤离至实验室外的安全区域。如有可能，远程或在撤离前启动最高等级的实验室内排风系统。关闭发生泄漏的实验室门以防止气体扩散。撤离后，警告他人不得进入。

   • 通知负责人、单位安全部门、物业管理部门、相关领导。等待专业应急人员（消防队、防化队）到达并处理泄漏点。

   • 调查泄漏原因（设备故障？操作失误？）并报告。

3. 发生爆炸、火灾。

   • 如果情况安全且运行（小火可控，如果火势蔓延或无法判断则立即放弃灭火），迅速按下停止键（Stop），关闭电源。关闭进气阀，关闭减压阀，关闭气瓶。

   • 通知区域内所有人员，立即撤离到安全距离。避免触碰飞溅的高温样品或碎片，立即上报设备负责人和实验室负责人。

   • 到达安全区域后，​立即联系119和校园保卫处，清晰说明下列条件：

     • 地点​（精确到实验室门号）。

     • 火灾/爆炸性质​：管式炉爆炸起火。

     • 有无化学品和气体​。

     • 人员伤亡或被困情况。

     • 在安全区等待消防队到达。向消防人员提供现场信息。

4. 管式炉发生短路（冒烟、火花、跳闸）

   • 立即断开管式炉供电空气开关​！不要操作设备面板上开关。

   • ​观察断电后，是否有冒烟、火花或异味持续出现。如持续，可能存在更严重的电气故障（如线路老化起火）。如发现，按火灾情况​​处理，组织疏散。

   • 未查明原因并修复前，严禁通电！联系负责人和厂家，等待专业人员排查原因。

7.3 低温冰柜

用前准备

1. 佩戴防低温手套
2. 检查冰柜温度情况

操作步骤

1. 打开冰柜柜门后提取所需离心管盒存放架
2. 拿取需要的样品，并放回离心管盒存放架
3. 关闭冰柜门，确保密封

注意事项

1. 冰柜柜门上不得放置任何物品
2. 小心冻伤

7.4 恒温培养箱

操作步骤

1. 设定培养温度
2. 打开箱门，放入密封、标记好的样品
3. 关闭并密封箱门

注意事项

1. 箱壁内胆和设备表面要经常擦拭，以保持清洁
2. 把需作培养实验的物品放入培养箱工作室内，上、下四周应留存一定空间保持工作室内气流畅通，关好箱门

7.5 移液枪¹

用前准备

1. 检查移液枪各部分完整度，确保套筒（5）洁净

图 7.3: Brand移液枪结构图

操作步骤

1. 调节操作容量
   • 顺时针调低容量，一步到位直接使用
   • 逆时针调高容量，应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，保证移液器的精确度
2. 枪头装卸
   • 选用对应量程匹配的枪头
   • 竖直嵌入并左右旋转拧紧枪头
   • 严禁竖直敲打牢固枪头

图 7.4: 枪头装配示意图

3. 吸液及放液

   • 吸液

     • 按照吸取液体体积，确定枪头浸没深度

     • 在转移液体前应润洗1-3次

       正向吸液（适用于流动性较好，粘度较低液体）

       • 按下配药按钮到第一阶段

       • 将移液管尖端垂直浸入液体

       • 保持浸没深度，缓慢回弹配药按钮，等待液体被吸取 如有必要将枪头尖端多余液体挂回离心管壁

       • 将移液管尖端以陡峭角度放在离心管壁上

       • 慢慢按下配药按钮至第一阶段，充分排出液体后按至第二阶段

       • 按住分配按钮将枪头尖端多余液体挂回离心管壁，缓慢回弹分配按钮

       反向吸液（适用于粘度较高，易起泡液体）

       • 按下配药按钮到第二阶段

       • 将移液管尖端垂直浸入液体

       • 保持浸没深度，缓慢回弹配药按钮，等待液体被吸取 如有必要将枪头尖端多余液体挂回离心管壁

       • 将移液管尖端以陡峭角度放在离心管壁上

       • 慢慢按下配药按钮至第一阶段

       • 按住分配按钮将枪头尖端多余液体挂回离心管壁，缓慢回弹分配按钮

       • 丢弃多余液体

图 7.5: 吸液深度最佳示意表

注意事项

1. 使用完成后务必将量程调到最大
2. 使用前后均需消毒移液枪表面
3. 使用后应放置在移液枪架上
4. 当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧
5. 分配按钮需要缓慢操作，放置速度过快，液体冲入移液枪内部
6. 提前熟悉各移液枪适配枪头的最大量程（一些枪头不能达到移液枪最大量程），尤其在进行反向吸液操作时需要注意量程

仪器维护

1. Eppendorf手动移液器维护保养
2. Brand手动移液器维护保养
3. 大龙移液枪的日常维护与校准

参考资料

1. 移液枪使用手册
2. 移液枪量程设置
3. 移液枪枪头润洗
4. 移液枪浸入深度和吸液角度
5. 移液枪吸液操作
6. 移液枪分液操作
7. 移液操作循环
8. 移液枪正反向移液
9. 涡旋振荡器和移液枪-溶液混匀
10. 正确使用移液枪

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1. 该部分主要以分子生物专用移液枪进行培训，大龙移液枪操作方法同理（如无准许，严禁使用分子生物移液枪）